【儀器網(wǎng) 產(chǎn)品文庫(kù)】DNA合成儀設(shè)計(jì)用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動(dòng)化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法,每次將一個(gè)核苷酸加到所接長(zhǎng)的寡核苷酸鏈上,加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細(xì)節(jié)隨不同的儀器而改變,廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
合成原理:
DNA的固相合成:即DNA3\'端固定于基質(zhì)上,然后沿3\'向5\'方向依次添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。
合成過程:
di一個(gè)堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個(gè)堿基的5’-OH用二對(duì)甲氧三苯甲基DMT保護(hù),堿基上的氨基用苯甲酸保護(hù),然后對(duì)3‘-OH用氨基磷酸化合物進(jìn)行活化。
1.1個(gè)堿基的5’-OH和下個(gè)堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯,
2.然后用dian氧化成磷酸三酯
3.加入二lv乙酸除去第二個(gè)堿基5’-OH上的保護(hù)劑DMT
循環(huán)進(jìn)行加入下一個(gè)堿基合成完畢后
1.用苯硫酚除去5’-OH上的保護(hù)劑DMT
2.用濃氫氧化銨將片段與固體樹脂斷開,洗脫
3.用濃氫氧化銨在加熱的條件下除去堿基上的保護(hù)劑
4.除去氫氧化銨,真空抽干
5.液相色譜或者PAGE,回收片段長(zhǎng)的。
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
2025廣州國(guó)際分析測(cè)試及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備展覽會(huì)暨技術(shù)研討會(huì)
展會(huì)城市:廣州市展會(huì)時(shí)間:2025-03-05