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【儀器網(wǎng) 行業(yè)應(yīng)用】一般在實(shí)際使用超臨界流體色譜時(shí)，根據(jù)物質(zhì)性質(zhì)以及操作條件的不同，超臨界流體色譜具有不同的分離方法。一般利用超臨界流體色譜分離藥物時(shí)，會(huì)分為直接分離法以及間接分離法。以下根據(jù)網(wǎng)上查詢資料，對(duì)超臨界流體色譜分離方法進(jìn)行整合：
1.直接分離法：超臨界流體色譜分離方法中的直接分離法可分為手性流動(dòng)相添加法以及手性固定相法。
手性流動(dòng)相添加劑法：手性流動(dòng)相添加劑法為手性添加劑吸附到固定相表面形成非對(duì)映體復(fù)合物，該立體反應(yīng)發(fā)生在流動(dòng)相中，包括手性包含復(fù)合法、手性配合交換法和手性離子對(duì)色譜法。
手性包含復(fù)合法經(jīng)常采用的添加劑是環(huán)糊精與手性冠醚。環(huán)糊精對(duì)疏水性和親水性藥物對(duì)映體都具有很強(qiáng)的包合作用。此法采用的固定相常為苯基與硅膠等。檢測(cè)方法多用電導(dǎo)檢測(cè)法。
手性配合交換法是將手性金屬配合劑加入流動(dòng)相中形成三元非對(duì)映體配合物，此配合物與固定相發(fā)生立體選擇性吸引或排斥反應(yīng)，因其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和能量的差異，使對(duì)映體得以分離。配合交換系統(tǒng)使用反相柱、疏水性固定相、水性流動(dòng)相和UV檢測(cè)系統(tǒng)。溶質(zhì)疏水性增加，保留時(shí)間延長(zhǎng)。
手性離子對(duì)色譜法是在流動(dòng)相中加入反離子，使之與流動(dòng)相中的對(duì)映體生成非對(duì)映的離子對(duì)復(fù)合物。因離子對(duì)復(fù)合物與固定相發(fā)生靜電，疏水或氫鍵作用產(chǎn)生差速遷移而得以分離。
手性流動(dòng)相添加劑法分析過(guò)程較少發(fā)生消旋化，添加劑選擇的范圍也寬，但添加劑在固定相表面的動(dòng)態(tài)吸附平衡時(shí)間長(zhǎng)，致使添加劑消耗大。
手性固定相法：手性固定相法是通過(guò)使用一個(gè)具有光學(xué)活性的環(huán)境即手性固定相來(lái)提供拆分所需要的手性中心。
2.間接分離法：間接分離法主要是指手性衍生化試劑法。而所謂手性衍生化試劑法，是指先將手性衍生化試劑與藥物外消旋體反應(yīng)，通過(guò)共價(jià)結(jié)合后在對(duì)映體分子中引入另一個(gè)手性中心，形成非對(duì)映體，再在非手性柱上分離的方法。手性衍生化試劑法應(yīng)用的手性化合物對(duì)映體的化學(xué)結(jié)構(gòu)中應(yīng)具有易于衍生化的基團(tuán)，如氨基、羧基、羥基或巰基等。手性試劑除了和反應(yīng)產(chǎn)物須有穩(wěn)定的化學(xué)和手性性質(zhì)，還須具有高的化學(xué)和光學(xué)純度，在貯存中不發(fā)生改變。
超臨界流體色譜法，作為目前較為前沿的分析分離技術(shù)，在工業(yè)、醫(yī)藥業(yè)以及相關(guān)行業(yè)的應(yīng)用較廣，因此對(duì)超臨界流體色譜分離方法進(jìn)行深入了解是有價(jià)值的。上述為不全面歸納，如有遺漏錯(cuò)誤，歡迎補(bǔ)充。
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