信帆現貨供應:甘油含量檢測試劑盒!
產品說明:
甘油是甘油三酯的水解產物。脂蛋白酯酶能水解血液中的甘油三酯;胰脂酶可以水解食 物 中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶能水解脂肪細胞中的甘油三酯。與游離脂肪酸一樣,甘油含量是甘油三酯水解反應的可靠檢測指標,但檢測更方便。本試劑盒采用甘油磷酸氧化酶法和經典GPO-Trinder 酶學反應相結合的方法,通過比色法測定液體樣本中的甘油含量。經過優化后,操作步驟更加簡單,檢測線性范圍在10-1200µmol/L,可靠性和重復性俱佳,適合生物醫學、食品實驗室檢測‘
檢測原理:
在ATP存在下甘油被甘油激酶磷酸化為3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化產生過氧化氫;在過氧化物酶作用下生色底物轉化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。
適用范圍:測定血液、細胞培養基、體液、酒類飲料中的甘油濃度。
所需設備:
酶標儀、生化分析儀或721、722型可見光分光光度計。最加工作波長550nm,如 無此波長建議優先選用570nm、次選530、490nm。
操作步驟:
一. 樣本處理:酒類、飲品、清澈液體樣本:可直接進行測定,如超過線性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后再測定。
培養液:取不含酚紅、無顏色、無血清的細胞培養基,如有細胞碎片應4oC,,12,000g離心5min, 取上清進行測定。
血液:新鮮抗凝血,4oC,2,000g 離心 5min 得到血漿;非抗凝血,先 4oC 靜置 2h 得到血清后, 2000g離心10min,除去血細胞。將得到的血漿/血清70oC 加熱10分鐘滅活內源脂肪酶,12,000g 離 心 10min ,取上清測定或-20oC 保存。
二 .工作溶液配制:按4:1比例,取4 ml試劑R1與 1 ml 試劑 R2 混合,立即使用或 4oC 保存 <1天,變色棄去。
三 .標準品稀釋:用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,將4mM甘油標準品倍比稀 釋為 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 µmol/L,通常取其中 4~6 管即可, 注意設置 0 濃度對照反應管。
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