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島津大講堂:溶解的空氣(氧)對檢測的影響

2020-03-27 15:05:46來源:島津關鍵詞:島津閱讀量:2117
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導讀:形成氣泡產生的影響較容易被理解,它往往使壓力波動,造成基線噪聲。然而,有時溶于溶劑的空氣并不形成氣泡,但其造成的影響依然是嚴重的,且不易被發現。溶解于溶劑的氣體中,氧氣對檢測的影響大,而且是多方面的。即使在當時的溫度、壓力下,溶解于溶劑的量并不飽和,不足以形成氣泡,其影響還是相當嚴重的。

 

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  第三期
 
  溶解的空氣(氧)對檢測的影響
 
  形成氣泡產生的影響較容易被理解,它往往使壓力波動,造成基線噪聲。然而,有時溶于溶劑的空氣并不形成氣泡,但其造成的影響依然是嚴重的,且不易被發現。
 
  1.大量溶解的氧氣對檢測的影響
 
  溶解于溶劑的氣體中,氧氣對檢測的影響大,而且是多方面的。即使在當時的溫度、壓力下,溶解于溶劑的量并不飽和,不足以形成氣泡,其影響還是相當嚴重的。
 
  (I)熒光檢測:當使用熒光檢測器來測定萘、芘等多核芳香烴或維生素E等生育酚時,溶解于流動相中的氧,由于熒光猝滅而影響化合物熒光強度,干擾測定。此時,盡管基線稍有降低,峰高的降低則更為明顯。例如,當大量氧氣溶于流動相對;測得萘的熒光強度(峰面積)只有完全脫氣以后萘的峰面積的25%。
 
 
  (II)電化學測定:特別是在還原電位下測定時,由于氧的濃度高,產生還原電流使信噪比變差。
 
  2.大量或可變的溶解氧對紫外檢測的影響
 
  在紫外區,氧本身就有吸收,使測得結果和基線都偏高,例如在210nm飽和有空氣的甲醇(氧的分壓 0.2大氣壓)在過氦脫氣以后,基線可降低0.32吸收單位(圖一)。
 
圖一:210nm測定時脫氣與否對基線的影響
 
  由引可見,經過脫氣可大大降低紫外區的背景。另一方面,氧氣的存在不僅使基線變高,而且當氧氣的濃度隨著壓力、溫度等諸因素變化而變化時,將使基線波動十分嚴重。由上例可知,如果在滿標尺 0.01吸收單位測定時,氧的濃度變化1%,將引起基線相當于30%滿標尺的變化。此外,當使用含氧的甲醇等作梯度洗脫時,隨著流動相甲醇的含量增多而升高的基線,有可能影響進一步的數據處理(見圖二)
 
  圖二:水-甲醇梯度洗脫時,脫氣與否對210nm處測定基線的影響,甲醇在30分鐘內由20-60%變化,然后維持5分鐘
 
  溶解氧的影響在短波區較為明顯,但也與溶劑種類有關,例如溶解氧對 四 氫funan的影響一直延伸至254mm處,在254 mm處,溶解氧的影響由 四 氫funan ,甲醇、乙腈、水逐漸降低。就乙腈而言,即使在較短長區影響也不明顯。因此,同樣的氧氣濃度、對不同的溶劑其影響也不同,可見其吸收的增加并非完全由于自身的吸收,也許還與氧與溶劑雜質之間的某些反應有一定的關系。
 
  進行紫外波外區高靈敏測定時,一般采用乙腈較好,如果為了提高分離效率,則一定要控制好溶解氧的量,換言之,必須采用適當的脫氣手段。
 
  3.溶解空氣量的變化引起示差檢測時的基線漂移
 
  折射率不僅與液體中固體或液體溶質的濃度有關,也與氣體溶質的濃度有關。因此,由于溫度變化而引起氣體溶解量的變化,將使折射率基線漂移波動。例如以 四 氫funan為溶劑,在滿標尺為8×10-6折射率單位的情況下測定時,溶劑中空氣的溶解量改變1%,則導致10%以上的基線變化。要抑制此種干擾,需使流動相處于恒溫,或用氦置換溶解的其它氣體,相對而言,氦的溶解度隨溫度的變化較小。
 
圖三:對示差檢測器基線的影響
 
  綜上所述,即使未形成氣泡,溶解的空氣對測定還是有影響的。
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